Με μέγεθος 180–200 kDa, η πρωτεΐνη S αποτελείται από ένα εξωκυτταρικό Ν-τερματικό άκρο, μια διαμεμβρανική περιοχή (TM) αγκυρωμένη στην ιική μεμβράνη και ένα κοντό ενδοκυτταρικό C-τερματικό τμήμα [11]. Η S υπάρχει κανονικά σε μια μετασταθερή, διάχυτη διαμόρφωση. Μόλις ο ιός αλληλεπιδράσει με το κύτταρο ξενιστή, συμβαίνει εκτεταμένη δομική αναδιάταξη της πρωτεΐνης S, επιτρέποντας στον ιό να συγχωνευθεί με τη μεμβράνη του κυττάρου ξενιστή. Οι ακίδες επικαλύπτονται με μόρια πολυσακχαρίτη για να καμουφλαριστούν, αποφεύγοντας την επιτήρηση του ανοσοποιητικού συστήματος του ξενιστή κατά την είσοδο.
Διάγραμμα που δείχνει την οργάνωση τομέα της πρωτεΐνης S του SARS-COV-2. Ν-τερματική περιοχή NTD, περιοχή δέσμευσης υποδοχέα RBD, πεπτίδιο σύντηξης FP, επανάληψη 1 επταδικής HR1, επανάληψη 2 επταδικής HR2, διαμεμβρανική περιοχή ΤΜ, κυτταροπλασματική ουρά CT. S1/S2 και S2’: Θέσεις διάσπασης της πρωτεΐνης S
Είναι πολύ ενδιαφέρον πώς ο ιός SARS-CoV-2 επιτυγχάνει σύντηξη κυτταρικής μεμβράνης χρησιμοποιώντας τον τομέα ακίδας S1 για να ξεκινήσει η σύντηξη, στη συνέχεια αποβάλλει τα 3 μέρη του (CTD1, CTD2, CTD3) στη θέση διάσπασης της φουρίνης και ξεδιπλώνοντας τον S2 τομέα για την ολοκλήρωση της σύντηξης με τη μεμβράνη του επιμολυσμένου κυττάρου (Ιοί, 202.11.11) “Είσοδος με τη μεσολάβηση της γλυκοπρωτεΐνης ακίδας των κορωνοϊών του SARS”:
Μια αναπαράσταση κινουμένων σχεδίων της διαδικασίας σύντηξης μεμβράνης που προκαλείται από γλυκοπρωτεΐνη SARS-CoV S. Μόνο το «επάνω» RBD είναι ικανό να δεσμεύσει τον υποδοχέα του μετατρεπτικού ενζύμου 2 (ACE2) της αγγειοτενσίνης και η δέσμευση ACE2 προάγει τη διάσταση των υπομονάδων S1 από την ακίδα τριμερούς. Η διάσταση των υπομονάδων S1 εκθέτει τις θέσεις διάσπασης S2' και μπορεί να οδηγήσει σε επέκταση των υπομονάδων S2 και απελευθέρωση του πεπτιδίου σύντηξης. Μετά την εισαγωγή των πεπτιδίων σύντηξης στη μεμβράνη του κυττάρου ξενιστή, οι α-ελικοειδείς περιοχές επανάληψης επταδών (HR1) των πρωτομερών S2 αναδιπλώνονται για να αλληλεπιδράσουν με τις περιοχές HR2 για να οδηγήσουν την προσέγγιση των ιικών και κυτταρικών μεμβρανών. Στη συνέχεια, τα διπλωμένα HR1 αλληλεπιδρούν με τα HR2 για να σχηματίσουν μια δέσμη εξαπλής έλικας που φέρνει την ιική μεμβράνη και τη μεμβράνη του κυττάρου ξενιστή αρκετά κοντά ώστε να επιτρέψει τη σύντηξη της μεμβράνης.
Οι διαφορές στις αποκρίσεις των Β κυττάρων στη μόλυνση και τον εμβολιασμό από SARS-CoV-2 μπορεί να αντικατοπτρίζονται στο εύρος δέσμευσης των αντισωμάτων σε διαφορετικές παραλλαγές SARS-CoV-2. Διαπιστώνουμε ότι το πλάσμα των ατόμων που έλαβαν αρχικό/ενισχυτικό εμβολιασμό BNT162b2, καθώς και των ατόμων που έλαβαν εμβόλια με αδενοϊικό φορέα (ChAdOx1-S ή Gam-COVID-Vac) ή αδρανοποιημένο ιό (BBIBP-CorV) COVID-19 εμφανίζουν σταθερά πρότυπα δέσμευσης σε παραλλαγές RBD με μέτριες μειώσεις σε σύγκριση με τη δέσμευση RBD στην Wuhan-Hu-1. Αντίθετα, οι ασθενείς με COVID-19 παράγουν αποκρίσεις αντισωμάτων με σημαντικά μεγαλύτερη προτίμηση δέσμευσης RBD Wuhan-Hu-1 και χαμηλότερο εύρος δέσμευσης παραλλαγής RBD. Αυτές οι διαφορές μεταξύ της δέσμευσης αντιγόνου παραλλαγής IgG του εμβολιασμένου και του ασθενούς από COVID-19 ήταν μεγαλύτερες για το RBD, τον στόχο των περισσότερων εξουδετερωτικών αντισωμάτων και μειώθηκαν όταν δοκιμάστηκε το αντιγόνο πλήρους ακίδας με τον μεγαλύτερο αριθμό μη εξουδετερωτικών επιτόπων του.
Τουλάχιστον μέρος του αντιγόνου ακίδας που δημιουργείται μετά τη χορήγηση του BNT162b2 κατανέμεται στο αίμα. Ανιχνεύσαμε αντιγόνο ακίδας στο 96% των εμβολιασμένων στο πλάσμα που συλλέχθηκε 1-2 ημέρες μετά την αρχική ένεση, με επίπεδα αντιγόνου να φτάνουν τα 174 pg/mL. Το εύρος των συγκεντρώσεων αντιγόνου ακίδας στο αίμα των εμβολιασμένων σε αυτό το πρώιμο χρονικό σημείο επικαλύπτεται σε μεγάλο βαθμό από το εύρος των συγκεντρώσεων αντιγόνου ακίδας που αναφέρθηκαν στο πλάσμα σε μια μελέτη οξείας λοίμωξης (Ogata et al., 2020), αν και ένας μικρός αριθμός μολυσμένων ατόμων είχε υψηλότερες συγκεντρώσεις στην περιοχή ng/mL (<1000 pg/mL). Σε μεταγενέστερα χρονικά σημεία μετά τον εμβολιασμό, οι συγκεντρώσεις του αντιγόνου ακίδας στο αίμα μειώνονται γρήγορα, αν και η ακίδα εξακολουθεί να ανιχνεύεται στο πλάσμα στο 63% των εμβολιασμένων 1 εβδομάδα μετά την πρώτη δόση. Ένα πρακτικό εύρημα στη μελέτη μας είναι ότι η ανίχνευση αντιγόνου ακίδας σε δείγματα πλάσματος παρεμποδίζεται μετά τον εμβολιασμό δεύτερης δόσης BNT162b2, πιθανότατα λόγω του σχηματισμού κυκλοφορούντων ανοσοσυμπλεγμάτων αντισωμάτων κατά της ακίδας και της πρωτεΐνης ακίδας, που καλύπτουν τους επιτόπους αντιγόνου της σύλληψης και αντισώματα ανίχνευσης που αποτελούν τη βάση των αναλύσεων ανίχνευσης αντιγόνου, παρόμοια με την παρεμβολή της δοκιμασίας που έχει αναφερθεί για άλλες ασθένειες.
Οι λεμφαδένες (LNs) ασθενών με COVID-19 έδειξαν μικρότερες ποσότητες αντιγόνου ακίδας (σε σύγκριση με τους εμβολιασμένους).
Έτσι, νωρίς μετά τον εμβολιασμό, η συγκέντρωση ακίδας S στο αίμα αναφέρεται ότι είναι παρόμοια με τη συγκέντρωση κατά τη διάρκεια μιας οξείας μόλυνσης. Για να μην πω τίποτα για αργότερα (έως 4 μήνες) ή για τη βιοκατανομή τους…
Παρά την παρουσία S1 και N σε ορισμένα δείγματα, η ακίδα ήταν ανιχνεύσιμη μόνο σε 5 από τους 64 θετικούς ασθενείς με COVID-19 (Συμπληρωματικό Σχ. 6). Η ακίδα μπορεί να μην είναι ανιχνεύσιμη σε ορισμένα δείγματα, καθώς το LOD είναι 1 τάξη μεγέθους υψηλότερο από το LOD της δοκιμής S1. Επιπλέον, στην δοκιμή Simoa για ακίδα, ο σχηματισμός ενός πλήρους ανοσοσυμπλέγματος εξαρτάται από τη δέσμευση της ακίδας στα σφαιρίδια σύλληψης της υπομονάδας S2 και στο αντίσωμα ανίχνευσης της υπομονάδας S1. Επομένως, υποθέτουμε ότι το ελεύθερο αντιγόνο ακίδας στο πλάσμα είναι πιθανό να διασπαστεί πρωτεολυτικά, απελευθερώνοντας την υπομονάδα S1 και το εναπομείναν θραύσμα πρωτεΐνης ακίδας δεν είναι ανιχνεύσιμο από την δοκιμή μας.
Αυτό σημαίνει ότι στη φυσική μόλυνση, η ακίδα S χάνει σχεδόν πάντα την υπομονάδα της S1 και το εναπομείναν θραύσμα πρωτεΐνης ακίδας S είναι επομένως μη ανιχνεύσιμο από το δοκίμιο ανίχνευσης. Αυτή είναι η υπόθεση τουλάχιστον. Ενώ η ακίδα S που παράγεται από το “εμβόλιο” περιφέρεται πλήρης και ανέπαφη, σταθεροποιημένη στην ανοιχτή της διαμόρφωση για εκκίνηση! Αυτό μπορεί να εξηγήσει τη διαφορά στα κλινικά αποτελέσματα, όπως η σπανιότητα της μυοκαρδίτιδας μετά την Covid σε σύγκριση με τη μετά το εμβόλιο ή η απουσία σχηματισμού θρόμβων αμυλοειδούς σε φυσικά μολυσμένα σε σύγκριση με τους εμβολιασμένους ασθενείς! Ή μήπως υπάρχει πολύ λιγότερη ακίδα S που περιφέρεται και για πολύ μικρότερο χρονικό διάστημα, κατά τη διάρκεια μιας φυσικής μόλυνσης;
Ας προσπαθήσουμε λοιπόν τώρα να υπολογίσουμε τον αριθμό των ακίδων S που παράγονται κατά τη διάρκεια μιας φυσικής μόλυνσης και επίσης μετά τον “εμβολιασμό”.
Εκτίμηση αριθμού στους εμβολιασμένους
Η ακίδα S, που δημιουργείται για μήνες μετά από ένα εμβόλιο mRNA ή αδενοϊού Covid, αποβάλλεται ενεργά από τα επιμολυσμένα κύτταρα μέσω εξωσωμάτων που μεταφέρουν την εν λόγω πρωτεΐνη ακίδας παντού σε μεγάλες ποσότητες. Τι ποσότητες είναι αυτές ακριβώς; Σύμφωνα με τον αριθμό που αναφέρεται στο podcast του Jeff Rense “Jeff & Erica - Explanation Of Deadly Amyloidosis And Amyloid Clots - A Revelation Of The Dangers“, είναι 30 τρισεκατομμύρια S spike αντίγραφα! Με τα βασικά μαθηματικά, λέει ο Jeff Rense.
Που μεταφράζεται στον αριθμό των μορίων mRNA ανά 30 μg εμβολίου της Pfizer (6,023×10^23 x 30x10^(-6)/1,341,379) = 1,35*10^13 = 13,5 τρισεκατομμύρια αντίγραφα mRNA,
και ανά 100μg εμβολίου της Moderna (6,023×10^23 x 100x10^(-6)/1.288.795) = 4,67*10^13 = 46,7 τρισεκατομμύρια αντίγραφα mRNA
Για τα διορθωμένα δεδομένα [ερευνητών], ο διάμεσος αριθμός πρωτεϊνών που μεταφράζονται ανά mRNA είναι 9.800 σε σύγκριση με την αρχική εκτίμηση των 900 των Schwanhausser et al. (2011) και τη δεύτερη εκτίμηση των 2.800. Στη μαγιά, η αναλογία των μορίων πρωτεΐνης που μεταφράζονται ανά mRNA είναι 4.200-5.600 (Ghaemmaghami et al., 2003 Lu et al., 2007 BNID 104745, 104185). Δεδομένου ότι τα κύτταρα των θηλαστικών έχουν μεγαλύτερο αριθμό αντιγράφων πρωτεΐνης από τη μαγιά (Milo et al., 2010), δεν είναι παράλογο ότι η αναλογία στα κύτταρα θηλαστικών θα είναι υψηλότερη.
Ένα μέσο μήκος ανθρώπινης πρωτεΐνης υπολογίζεται σε 400aa. Καθώς η ακίδα S στο εμβόλιο είναι 1273-1300aa, είναι 3 φορές μεγαλύτερη. Έτσι, από την εκτίμηση των 1000-10.000 αντιγράφων, μπορούμε να το μειώσουμε σε 300-3.000 αντίγραφα ακίδων S που παράγονται ανά mRNA.
Αυτό δεν λαμβάνει υπόψη ότι το mRNA στο εμβόλιο έχει βελτιστοποιηθεί στη μετάφραση και έχει σταθεροποιηθεί με ψευδουριδίνη. Άρα, πρέπει να πολλαπλασιάσουμε αυτόν τον αριθμό με κάποιον παράγοντα, ας πούμε δέκα. Στη συνέχεια, η ελάχιστη εκτίμηση των ακίδων S ανά mRNA αυξάνεται στα 3.000 αντίγραφα. Συντηρητικά.
Αλλά ας υποθέσουμε ότι μόνο ένα στα χίλια αντίγραφα mRNA που έχουν εγχυθεί με ένεση διαμολύνει με επιτυχία ένα ανθρώπινο κύτταρο (διαιρείται με 1.000), τότε μπορούμε να μετρήσουμε:
((13,5x10^12 έως 46,7x10^12) / 1.000 ) x (3.000 ακίδες ανά mRNA) = 40-140 τρισεκατομμύρια ακίδες S;
Το ιοσωμάτιο COVID-19 έχει περίπου 30 έως 40 ακίδες.
Αριθμός ιοσωμάτων σε ένα μολυσμένο άτομο
Αυτό το δεύτερο γράφημα δείχνει τον αριθμό των αντιγράφων RNA από τη δοκιμή PCR ή τις μολυσματικές μονάδες από αυτές τις μετρήσεις TCID50 στα όργανα των πιθήκων ρέζους. Χρησιμοποιώντας το βάρος των πνευμόνων, μπορούμε να υπολογίσουμε τον αριθμό των ιοσωμάτων σε έναν άνθρωπο. Υπάρχουν 10^9 έως 10^11 αντίγραφα RNA, αλλά 4 φορές λιγότερα μολυσματικά. Έτσι, ο αριθμός των ιοσωμάτων είναι μεταξύ 100.000 και 10.000.000. Η απλή προέκταση σε γυναίκες και παιδιά, με βάση το μέγεθος, θα ήταν ανακριβής, καθώς και οι δύο ομάδες έχουν διαφορετικές απαντήσεις στην COVID-19 από τους άνδρες. Ορισμένες μελέτες προτείνουν ότι το ιικό φορτίο θα μειωνόταν περαιτέρω κατά μια άλλη τάξη μεγέθους για τα παιδιά, αλλά ποιος πραγματικά ξέρει;
Αριθμός κυττάρων που έχουν μολυνθεί
Για αυτόν τον υπολογισμό, οι ερευνητές χρησιμοποίησαν δεδομένα για άλλους κορωνοϊούς για να υπολογίσουν ότι κάθε μολυσμένο κύτταρο περιέχει 10 έως 100 μολυσματικά ιοσωμάτια. Έχοντας υπολογίσει τον συνολικό αριθμό των ιοσωμάτων που υπάρχουν, μπορούν επίσης να εκτιμήσουν τον αριθμό των κυττάρων που έχουν μολυνθεί. Στην κορυφή της μολυσματικότητας, μολύνονται 10^4 έως 10^6 κύτταρα, περίπου το 0,001% έως το 0,00001% του συνόλου μας.
Άρα, 100.000 έως 10.000.000 ενεργοί ιοί, αλλά 10.000 φορές περισσότεροι “νεκροί”, άρα 1 έως 100 δισεκατομμύρια ιογενή αντίγραφα συνολικά;
Μια άλλη πηγή λέει επίσης ότι η εκτίμηση του αριθμού των ιών που παράγονται στην κορύφωση μιας μόλυνσης από Covid μπορεί να είναι από 1 έως 100 δισεκατομμύρια.
Έτσι, ένα φυσικό μολυσμένο άτομο μπορεί να παράγει 35 δισεκατομμύρια έως 3,5 τρισεκατομμύρια ακίδες S
Βλέπουμε λοιπόν ότι το χαμηλό άκρο της εκτίμησής μας για τον αριθμό των ακίδων S που παράγονται μετά από ένα έμβολο mRNA είναι 10-30 φορές υψηλότερο από την εκτίμηση υψηλού επιπέδου του αριθμού των ακίδων S που παράγονται κατά τη διάρκεια μιας φυσικής μόλυνσης.
Φυσικά, θα θέλαμε να λάβουμε τους ακριβείς παράγοντες που υπολογίζουμε στους υπολογισμούς μας από τις αντίστοιχες μελέτες της Moderna και των Pfizer/BioNTech και τις αιτήσεις εξουσιοδότησης χρήσης έκτακτης ανάγκης. Ή από τον FDA που εξετάζει και εγκρίνει αυτές τις αιτήσεις EUA. Ή από τις πολλαπλές ανεξάρτητες, αξιολογημένες επιστημονικές μελέτες για αυτό το σκοπό. Θα ήθελα οι ελεγκτές δεδομένων να μου υποδείξουν αυτές τις πληροφορίες…
