Η δοκιμή των Pfizer/BioNTech C4591001 - Έκθεση ελέγχου - v1 (31-05-2024)
Επανανάλυση των δεδομένων και ανωμαλίες που καταγράφηκαν - Μέρος 6ο
*των OPENVAET, DR AH KAHN SYED, JOSH GUETZKOW, MODARN_LIFE, JKUNADHASAN και BROOK JACKSON*
Διαδικασία 1 & Διαδικασία 2 - Επισκόπηση διαφορών
Κατά την ανάπτυξη του υποψήφιου εμβολίου για την COVID-19, BNT162b2 (εμπορικά γνωστό ως Comirnaty), οι Pfizer/BioNTech χρησιμοποίησαν δύο διαφορετικές μεθόδους παραγωγής, τις οποίες ανέφεραν ως “Διαδικασία 1” και “Διαδικασία 2”.
Το ερευνητικό πρωτόκολλο [102] για την κλινική δοκιμή αναφέρει: “Το αρχικό BNT162b2 κατασκευάστηκε με τη χρήση “Διαδικασίας 1”. Ωστόσο, η “Διαδικασία 2” αναπτύχθηκε για να υποστηρίξει μια αυξημένη κλίμακα παραγωγής”. Πρόσθετα στοιχεία μπορούν να βρεθούν σε άλλα ρυθμιστικά έγγραφα από τον FDA των ΗΠΑ, τον Ιαπωνικό Οργανισμό Φαρμακευτικών και Ιατρικών Συσκευών (PMDA), την TGA και τον Ευρωπαϊκό Οργανισμό Φαρμάκων (EMA). Για να πάρουμε ένα παράδειγμα, η Έκθεση Αξιολόγησης Προϊόντος του EMA (PAR) για το Comirnaty με ημερομηνία 19 Φεβρουαρίου 2021, αναφέρει: “Έχουν χρησιμοποιηθεί δύο διεργασίες δραστικών ουσιών κατά τη διάρκεια του ιστορικού ανάπτυξης. Διαδικασία 1 (υλικό κλινικής δοκιμής) και Διαδικασία 2 (εμπορική διαδικασία)” [103].
Εκτός από τη δήλωση PAR του EMA που αναφέρεται στο σημείο 83, η οποία υποδεικνύει ότι η Διαδικασία 1 χρησιμοποιήθηκε για τις δόσεις των κλινικών δοκιμών, ενώ η Διαδικασία 2 χρησιμοποιήθηκε για τις εμπορικές δόσεις, μια επιβεβαιωτική δήλωση προέρχεται από τον PMDA της Ιαπωνίας στην “Έκθεση περί Ειδικής Έγκρισης για Έκτακτη Ανάγκη” με ημερομηνία 8 Φεβρουαρίου 2021: “Η δραστική ουσία που χρησιμοποιείται για μη κλινικές και κλινικές μελέτες παρασκευάζεται από τη Διαδικασία 1 και η δραστική ουσία στην προτεινόμενη εμπορική σύνθεση από τη Διαδικασία 2” [104].
Η τροπολογία 7 στο πρωτόκολλο με ημερομηνία Οκτ. 6105 αναφέρει: “Προστέθηκε ένας πρόσθετος διερευνητικός στόχος για την περιγραφή της ασφάλειας και της ανοσογονικότητας σε συμμετέχοντες ηλικίας 16 έως 55 ετών που εμβολιάστηκαν με παρέμβαση μελέτης που παρήχθη από την κατασκευαστική “Διαδικασία 1” ή “Διαδικασία 2””. Αυτή η τροπολογία αναλύεται στην ενότητα 6.1.1: “Η κλίμακα κατασκευής του BNT162b2 έχει αυξηθεί για να υποστηρίξει τη μελλοντική προσφορά. Το BNT162b2 που παράγεται χρησιμοποιώντας τη διαδικασία παραγωγής που υποστηρίζει αυξημένη προσφορά (“Διαδικασία 2”) θα χορηγηθεί σε περίπου 250 συμμετέχοντες ηλικίας 16 έως 55 ετών, ανά παρτίδα, στη μελέτη. Η ασφάλεια και η ανοσογονικότητα του προφυλακτικού BNT162b2 σε άτομα ηλικίας 16 έως 55 ετών που έχουν εμβολιαστεί με υλικό που παράγεται με την υπάρχουσα διαδικασία παραγωγής “Διαδικασία 1” και με υλικό από παρτίδες που παράγονται με τη διαδικασία παραγωγής που υποστηρίζει αυξημένη προσφορά, “Διαδικασία 2”, θα περιγραφεί” [106].
Το πρωτόκολλο κλινικών δοκιμών που αναφέρεται στην παράγραφο 65 συνοψίζει τρεις βασικές διαφορές μεταξύ της Διαδικασίας 1 και 2: “Οι αλλαγές της διαδικασίας σχετίζονται με τη μέθοδο παραγωγής για το πρότυπο DNA από το οποίο μεταγράφεται η φαρμακευτική ουσία RNA και τη μέθοδο καθαρισμού της φαρμακευτικής ουσίας RNA. Το φαρμακευτικό προϊόν BNT162b2 παράγεται στη συνέχεια χρησιμοποιώντας μια κλιμακούμενη διαδικασία παραγωγής LNP” [107].
Οι διαφορές μεταξύ των Διαδικασιών 1 και 2 δεν είναι ασήμαντες. Ένα έγγραφο που ελήφθη από τον TGA [108] περιγράφει λεπτομερώς ορισμένες από τις βασικές αλλαγές που πραγματοποιήθηκαν μεταξύ "Διαδικασίας 1" και "Διαδικασίας 2", αν και πολλές λεπτομέρειες έχουν λογοκριθεί. Στη Διαδικασία 1, το εκμαγείο DNA για τη μεταγραφή mRNA παρήχθη μέσω ενίσχυσης PCR. Η Διαδικασία 2 χρησιμοποιεί γραμμικοποιημένο πλασμιδιακό DNA που καλλιεργήθηκε σε βακτήρια E. coli. Το γραμμικοποιημένο πλασμιδικό DNA περιλαμβάνει τη χρήση πλασμιδικού DNA, το οποίο είναι ένα μικρό, κυκλικό, δίκλωνο μόριο DNA που βρίσκεται συνήθως στα βακτήρια. Πρόσθετες λεπτομέρειες (μερικώς λογοκριμένες) περιέγραψαν αλλαγές στον in-vitro όγκο αντίδρασης μεταγραφής, την κλίμακα παρτίδας και τη διαδικασία καθαρισμού (Μαγνητικά σφαιρίδια στη Διαδικασία 1, επεξεργασία με πρωτεϊνάση Κ για πέψη πρωτεϊνών και απελευθέρωση σχετιζόμενων νουκλεϊκών οξέων ακολουθούμενη από διήθηση εφαπτομενικής ροής στη Διαδικασία 2).
Αναγνωρίζοντας τις παρτίδες της Διαδικασίας 2
Σε ορισμένα κανονιστικά έγγραφα, η Διαδικασία 1 αναφέρεται μερικές φορές ως “κλασική” διαδικασία και το προϊόν που προκύπτει αναφέρεται ως “κλινική προμήθεια”. Η Διαδικασία 2 αναφέρεται ως “έκτακτης ανάγκης” ή “εμπορική” προμήθεια. Αυτό φαίνεται σε έγγραφο που δημοσιοποίησε η TGA. Πρόκειται για το έγγραφο 4 της FOI 3659, με τίτλο “BNT162b2 (PF-07302048) Έκθεση συγκρισιμότητας για παρτίδες φαρμακευτικών προϊόντων PPQ” [109], το οποίο παραθέτει τις παρτίδες που διανέμονται, τη χρήση τους και τις αντίστοιχες διαδικασίες παραγωγής τους.
Η αναφορά συγκρισιμότητας διακρίνει τις παρτίδες κλινικών, έκτακτων και εμπορικών προμηθειών ως εξής: “Η διαδικασία παρασκευής φαρμακευτικών προϊόντων έχει εξελιχθεί από κλινική προμήθεια σε παροχή έκτακτης ανάγκης και τέλος σε εμπορική προμήθεια, μεταφέροντας σε διαφορετικές εγκαταστάσεις παραγωγής και κλιμάκωση της διαδικασίας. Η κλινική προμήθεια παρήχθη αρχικά στο Polymun της Αυστρίας (“κλασική” διαδικασία). Προκειμένου να βελτιωθεί η απόδοση μάζας της διαδικασίας LNP και να αυξηθεί το μέγεθος της παρτίδας, η διαδικασία κλιμακώθηκε στο Polymun (διαδικασία “αναβαθμισμένης κλίμακας”) ακολουθούμενη από μεταφορά του φαρμακευτικού προϊόντος χύδην (πλήρης σύνθεση LNP πριν από το στείρο φιλτράρισμα) στην Pfizer στο Puurs του Βελγίου, για εργασίες πλήρωσης/τελικής επεξεργασίας (για την κατασκευή “προμήθειας έκτακτης ανάγκης” και εμπορικής προμήθειας). Αυτή η διαδικασία έχει επίσης εγκατασταθεί στη mibe (Dermapharm) στη Γερμανία για την κατασκευή υλικού έκτακτης ανάγκης. Στο πλαίσιο αυτό, οι εργασίες πλήρωσης/τελικής επεξεργασίας στο Puurs διεξήχθησαν αρχικά στη γραμμή S2F2 (για κλινική προμήθεια) με μετάβαση στη γραμμή WSL5 για μεγαλύτερους όγκους παρτίδων (προμήθεια έκτακτης ανάγκης και στη συνέχεια για εμπορική προμήθεια). Για τη συνήθη εμπορική παραγωγή, η διαδικασία παραγωγής LNP έχει μεταφερθεί πλήρως στην Pfizer στο Puurs του Βελγίου με εργασίες πλήρωσης/τελικής επεξεργασίας στις γραμμές πλήρωσης WSL5, FC2 και VC2 και στην Pfizer στο Kalamazoo των ΗΠΑ με εργασίες πλήρωσης/τελικής επεξεργασίας στις γραμμές πλήρωσης L8 και L18 (για την κατασκευή “εμπορικής προμήθειας”)” [110].
Μπορούμε να προσδιορίσουμε ποιες παρτίδες είναι Διαδικασίας 1 ή Διαδικασίας 2 από το ίδιο έγγραφο, με βάση τις παρτίδες που αναφέρονται στον Πίνακα 1 στη σελίδα 4 και στις σημειώσεις Β και Ε στον Πίνακα 3 στη σελίδα 11. Πρόσθετες πληροφορίες σχετικά με τη διαδικασία που χρησιμοποιείται για την κατασκευή των παρτίδων προέρχονται από ένα έγγραφο που κυκλοφόρησε σύμφωνα με το FOI από τον FDA [111]. Αυτό το έγγραφο έχει τίτλο "125742_S2_M3_32p5_batch_analyses.pdf" - Ο Πίνακας 3.2.P.5.4-1 “Σύνοψη των παρτίδων φαρμακευτικού προϊόντος BNT162b2” στη σελίδα 4 του εγγράφου περιέχει τις σχετικές πληροφορίες. Και τα δύο αυτά έγγραφα θα αναφέρονται παρακάτω.
Καθορίζοντας ποιες παρτίδες της Διαδικασίας 2 χρησιμοποιήθηκαν στην κλινική δοκιμή C4591001
Ένα έγγραφο που κυκλοφόρησε από τον FDA αναφέρει λεπτομερώς ποιες παρτίδες είχαν αποσταλεί σε ποιο κέντρο κλινικής έρευνας περίπου 6 μήνες μετά τη δοκιμή. Χρονολογείται στις 17 Μαρτίου 2021 και έχει τίτλο "125742_S1_M5_5351_c4591001-interim-mth6-patient-batches.pdf" [112]. Οι ακόλουθοι μοναδικοί αριθμοί παρτίδων παρατίθενται σε αυτό το έγγραφο: BCV10320-A, BCV10420-A, BCV20420-A, BCV40420-A, BCV40620-A, BCV40620-B, BCV40620-C, BCV40620-D, BCV40720-A, BCV40720-B , BCV40720-C, ED3938, EE3813, EE8493Z και EJ0553Z. Δεν είναι σαφές σε τι αναφέρεται το “Z” στο τέλος των παρτίδων EE8493 και EJ0553. Σε άλλα έγγραφα, αυτές οι παρτίδες παρατίθενται χωρίς το επίθεμα Z. Μπορεί να χρησιμοποιήθηκε για να προσδιορίσει ότι αυτές οι παρτίδες που χρησιμοποιήθηκαν στη δοκιμή ήταν από τη Διαδικασία 2.
Με βάση τους πίνακες από έγγραφα των TGA και FDA που αναφέρονται στα σημεία 88 και 90 παραπάνω, όλες οι παρτίδες που ξεκινούν με “BCV” είναι παρτίδες Διαδικασίας 1. Η παρτίδα ED3983 παρατίθεται στον Πίνακα 3.2.P.5.4-1 του εγγράφου ανάλυσης παρτίδας του FDA που αναφέρεται στο σημείο 90 ως “κλινική” παρτίδα και επισημαίνεται με τη σημείωση Α, η οποία ορίζεται στη σελίδα 13 ως “ισοδύναμη με τη BCV40720-P”, η οποία καθιερώθηκε ως παρτίδα Διαδικασίας 1 στο σημείο 91. Η παρτίδα EE3813 αναφέρεται ως κλινική παρτίδα Διαδικασίας 1 και στους δύο πίνακες.
Δύο παρτίδες Διαδικασίας 2 προσδιορίζονται στο έγγραφο παρτίδων ασθενών 6 μηνών που αναφέρεται στο σημείο 91: EE8493 και EJ0553. Η παρτίδα EE8493 παρατίθεται ως παρτίδα Διαδικασίας 2 στον Πίνακα 1 του εγγράφου "Αναφορά συγκρισιμότητας για παρτίδες προϊόντων φαρμάκων PPQ" της TGA που αναφέρεται στο σημείο 90 παραπάνω (βλ. στήλη με την ένδειξη "Διαδικασία DS και τοποθεσία παρασκευής"). Η παρτίδα EJ0553 παρατίθεται στην αναφορά συγκρισιμότητας της TGA στη σημείωση 'd' του Πίνακα 3 στη σελίδα 11. Η σημείωση 'd' στον Πίνακα 3 επισυνάπτεται στη στήλη "Ιστορικό εύρος: Παροχή έκτακτης ανάγκης", η οποία υποδεικνύει ότι η EJ0553 είναι παρτίδα προμήθειας έκτακτης ανάγκης, που ήταν ένας άλλος όρος για τη Διαδικασία 2. Η σημείωση 'd' διευκρινίζει περαιτέρω ότι η τοποθεσία κατασκευής της παρτίδας EJ0553 ήταν "Polymun/Puurs WSL5", η οποία, με βάση την περιγραφή από το έγγραφο που αναφέρεται στο σημείο 88, παρέχει πρόσθετες αποδείξεις ότι η EJ0553 ήταν μια παρτίδα προμήθειας έκτακτης ανάγκης και όχι μια κλινική παρτίδα, επειδή κάθε παρτίδα στον Πίνακα 1 με το "DP Site of Manufacture" που αναφέρεται ως "Polymun/Puurs WSL5" είναι μια παρτίδα Διαδικασίας 2. Αυτό είναι απολύτως συνεπές με την περιγραφή της εξέλιξης της διαδικασίας παραγωγής στη σελίδα 3, όπως αναφέρεται στο σημείο 70 παραπάνω. Πολλές από τις άλλες παρτίδες στη σημείωση 'd' παρατίθενται στον Πίνακα 1 στις σελίδες 4-5 της αναφοράς συγκρισιμότητας της TGA, όλες επισημαίνονται ως Διαδικασίας 2 και καμία από τις παρτίδες που αναφέρονται στη σημείωση 'd' στον Πίνακα 3 δεν παρατίθεται στον Πίνακα 1 ως κλινική (Διαδικασίας 1) παρτίδα. Επιπλέον, όλες οι κλινικές παρτίδες παρατίθενται χωριστά στη σημείωση ‘Β’ του Πίνακα 3 στη σελίδα 11. Η παρτίδα EJ0553 παρατίθεται στο έγγραφο “Ανάλυση παρτίδων” του FDA που αναφέρεται στο σημείο 90 τόσο ως προμήθεια έκτακτης ανάγκης, όσο και ως κλινική παρτίδα. Δεδομένου ότι η παρτίδα EE8493 αναφέρεται επίσης ως παρτίδα έκτακτης ανάγκης και ως κλινική παρτίδα, αυτό υποδηλώνει ότι τόσο η EE8493, όσο και η EJ0553 χρησιμοποιήθηκαν κάπως στην κλινική δοκιμή και ήταν επίσης μέρος της προμήθειας έκτακτης ανάγκης.
Επιπλέον, σχεδόν όλες οι ανεπιθύμητες ενέργειες που αναφέρθηκαν [113] στο Σύστημα Αναφοράς Ανεπιθύμητων Συμβάντων Εμβολίων (VAERS [114]) των Κέντρων Ελέγχου Νόσων των Ηνωμένων Πολιτειών για τις παρτίδες EE8493 και EJ0553 έχουν ημερομηνία εμβολιασμού μετά την έγκριση του Comirnaty για προσωρινή χρήση στο ΗΒ. Καμία από τις άλλες παρτίδες που αναφέρονται ως προμηθευμένες στις τοποθεσίες έρευνας δεν έχει αναφορές ανεπιθύμητων ενεργειών στο VAERS [115]. Αυτό παρέχει πρόσθετες ενδείξεις ότι οι EE8493 και EJ0553 ήταν παρτίδες σκευασμάτων Διαδικασίας 2, καθώς διανεμήθηκαν και χορηγήθηκαν εμπορικά μετά την εξουσιοδότηση.
ΣΥΝΕΧΙΖΕΤΑΙ…
Παραπομπές
102 NEJM.org - Protocol - https://www.nejm.org/doi/suppl/10.1056/NEJMoa2034577/suppl_file/nejmoa2034577_protocol.pdf, Σελίδα 174
103 European Medicine Agency - Committee for Medicinal Products for Human Use (CHMP) - Product Assessment report (PAR) - https://www.ema.europa.eu/en/documents/assessment-report/comirnaty-epar-public-assessment-report_en.pdf, Page 18
104 Pharmaceutical and Medical Products Agency - Pharmaceutical Evaluation Division, Pharmaceutical Safety and Environmental Health Bureau, Ministry of Health, Labour and Welfare - Report on the Deliberation Results - https://www.pmda.go.jp/files/000243206.pdf, Σελίδα 13
105 PHMPT.org - Protocol C4591001 Protocol Amendment 9, 29 October 2020 - https://phmpt.org/wp-content/uploads/2022/03/125742_S1_M5_5351_c4591001-fa-interim-protocol.pdf, Σελίδα 310
106 PHMPT.org - Protocol C4591001 Protocol Amendment 9, 29 October 2020 - https://phmpt.org/wp-content/uploads/2022/03/125742_S1_M5_5351_c4591001-fa-interim-protocol.pdf, Σελίδα 360
107 PHMPT.org - Protocol C4591001 Protocol Amendment 9, 29 October 2020 - https://phmpt.org/wp-content/uploads/2022/03/125742_S1_M5_5351_c4591001-fa-interim-protocol.pdf, Σελίδα 360
108 Australian TGA, FOI 2389 - Pfizer/BioNTech COVID-19 mRNA vaccine (BNT162, PF-07302048) TGA Pre-Submission Meeting - https://www.tga.gov.au/sites/default/files/foi-2389-03-1.pdf, Σελίδες 21 έως 23
109 Australian TGA, FOI 3659 - BNT162b2 (PF-07302048) Comparability Report for PPQ Drug Product Lots - https://www.tga.gov.au/sites/default/files/2022-08/foi-3659-04.pdf, Σελίδες 4 & 5
110 Australian TGA, FOI 3659 - BNT162b2 (PF-07302048) Comparability Report for PPQ Drug Product Lots - https://www.tga.gov.au/sites/default/files/2022-08/foi-3659-04.pdf, Σελίδα 3
111 PHMPT.org - 125742_S2_M3_32p5_batch-analyses.pdf, BNT162b2 3.2.P.5.4. Batch Analyses - https://phmpt.org/wp-content/uploads/2023/11/125742_S2_M3_32p5_batch-analyses.pdf, Σελίδα 3
112 PHMPT.org - 125742_S1_M5_5351_c4591001-interim-mth6-patient-batches.pdf - https://phmpt.org/wp-content/uploads/2022/06/125742_S1_M5_5351_c4591001-interim-mth6-patient-batches.pdf
113 Documentation - The Vaccine Adverse Event Reporting System (VAERS).txt - https://github.com/OpenVaet/pfizer_docs_R/blob/main/vaers/The%20Vaccine%20Adverse%20Event%20Reporting%20System%20(VAERS).txt
114 Centers for Disease Control & Prevention - VAERS - https://wonder.cdc.gov/vaers.html, VAERS Data Search, “Group by: Year Reported, Month Reported, Vaers Id”, “Vaccine Products: COVID19 (COVID19 VACCINE), COVID19-2 (COVID19-2)”, “Vaccine Manufacturer: Pfizer\BioNTech”, “Vaccine lot: EE8493, EJ0553”
115 Documentation - The Vaccine Adverse Event Reporting System (VAERS)_other_batches.txt - https://github.com/OpenVaet/pfizer_docs_R/blob/main/vaers/The%20Vaccine%20Adverse%20Event%20Reporting%20System%20(VAERS)_other_batches.txt